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发布时间:2022-10-03   点击次数:583次
  微生物elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠内毒素(ET)elisa试剂盒捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微生物硫化氢(H2S)ELISA检测试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
 
  微生物elisa检测试剂盒准备:
 
  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
 
  20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
 
  微生物elisa检测试剂盒操作步骤:
 
  1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
 
  2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
 
  3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
 
  4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
 
  5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
 
  6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
  使用注意事项:
 
  1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
 
  2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
 
  3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
 
  4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
 
  5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
 
  6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
 
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